クリーンルームにおける汚染の主な発生源は、粒子と微生物の2つです。これらは、人的要因や環境要因、あるいはプロセスにおける関連活動によって引き起こされる可能性があります。最善の努力を尽くしても、汚染はクリーンルーム内に侵入する可能性があります。一般的な汚染物質の媒介物としては、人体（細胞、毛髪）、塵、煙、霧などの環境要因、機器（実験装置、洗浄装置）、不適切な拭き取り方法や洗浄方法などが挙げられます。
最も一般的な汚染源は人です。最も厳格な服装規定や作業手順を遵守しても、訓練不足の作業員はクリーンルームにおける最大の汚染リスクとなります。クリーンルームのガイドラインに従わない従業員は、高リスク要因です。従業員が一人でもミスをしたり、手順を忘れたりすると、クリーンルーム全体が汚染される可能性があります。企業がクリーンルームの清浄度を保証できるのは、継続的な監視と、汚染率ゼロを目指した継続的な研修の実施のみです。
その他の主な汚染源は、工具や機器です。カートや機械をクリーンルームに入る前にざっと拭いただけの場合、微生物が持ち込まれる可能性があります。多くの場合、作業員は車輪付きの機器がクリーンルームに押し込まれる際に汚染された表面の上を転がっていることに気づいていません。床、壁、機器などの表面は、トリプティケースソイ寒天培地（TSA）やサブローデキストロース寒天培地（SDA）などの培養培地を含む特別に設計された接触プレートを使用して、生菌数を定期的に検査します。TSAは細菌用に設計された培養培地であり、SDAはカビや酵母用に設計された培養培地です。TSAとSDAは通常、異なる温度で培養され、TSAはほとんどの細菌にとって最適な生育温度である30～35℃の範囲の温度にさらされます。20～25℃の範囲は、ほとんどのカビや酵母種にとって最適な温度です。
かつては空気の流れが汚染の一般的な原因でしたが、今日のクリーンルーム用HVACシステムは空気汚染をほぼ完全に排除しています。クリーンルーム内の空気は、粒子数、生菌数、温度、湿度について定期的に（例えば、毎日、毎週、四半期ごと）制御および監視されています。空気中の粒子数を制御するためにHEPAフィルターが使用され、0.2µmまでの粒子をろ過する能力があります。これらのフィルターは通常、室内の空気の質を維持するために、校正された流量で連続運転されます。湿度は、湿度の高い環境を好む細菌やカビなどの微生物の増殖を防ぐために、通常は低いレベルに保たれています。
実際、クリーンルームにおける最も深刻で一般的な汚染源は、作業者自身である。
汚染源や汚染経路は業界によって大きく異なるわけではありませんが、許容できる汚染レベルと許容できない汚染レベルに関しては業界間で違いがあります。例えば、経口錠剤の製造業者は、人体に直接投与される注射剤の製造業者と同じレベルの清浄度を維持する必要はありません。
製薬会社は、ハイテク電子機器メーカーに比べて、微生物汚染に対する許容度が低い。微細な製品を製造する半導体メーカーは、製品の機能性を確保するため、いかなる微粒子汚染も許容できない。そのため、これらの企業は、人体に埋め込まれる製品の無菌性と、チップや携帯電話の機能性のみを重視している。クリーンルームにおけるカビ、真菌、その他の微生物汚染については、比較的懸念が少ない。一方、製薬会社は、あらゆる生物および死菌による汚染源を懸念している。
製薬業界はFDAの規制を受けており、医薬品製造における汚染の影響は非常に有害であるため、医薬品製造管理基準（GMP）規制を厳格に遵守しなければなりません。医薬品メーカーは、製品に細菌が含まれていないことを保証するだけでなく、すべての文書化と追跡も義務付けられています。ハイテク機器メーカーは、内部監査に合格すればノートパソコンやテレビを出荷できます。しかし、製薬業界ではそう簡単ではありません。そのため、クリーンルームの運用手順を策定、使用、文書化することが企業にとって非常に重要です。コスト面を考慮すると、多くの企業は清掃業務を外部の専門清掃業者に委託しています。
包括的なクリーンルーム環境試験プログラムには、目に見えるものと見えないものの両方の浮遊粒子を含めるべきです。これらの管理された環境におけるすべての汚染物質を微生物によって同定する必要はありませんが、環境管理プログラムには、サンプル抽出液の適切なレベルの細菌同定を含めるべきです。現在、利用可能な細菌同定方法は数多くあります。
細菌同定の最初のステップ、特にクリーンルーム隔離においては、グラム染色法が重要です。グラム染色法は、微生物汚染源の特定に役立つ手がかりを提供します。微生物の分離・同定でグラム陽性球菌が検出された場合、汚染源はヒトである可能性があります。グラム陽性桿菌が検出された場合、汚染源は塵埃または消毒剤耐性菌である可能性があります。グラム陰性桿菌が検出された場合、汚染源は水または湿った表面である可能性があります。
医薬品クリーンルームにおける微生物の同定は、製造環境におけるバイオアッセイ、最終製品の細菌同定試験、滅菌製品および水中の未同定微生物、バイオテクノロジー産業における発酵貯蔵技術の品質管理、バリデーション中の微生物試験検証など、品質保証の多くの側面に関係するため、非常に重要です。FDAが採用している、細菌が特定の環境で生存できることを確認する方法は、今後ますます一般的になるでしょう。微生物汚染レベルが規定値を超えた場合、または滅菌試験の結果が汚染を示している場合は、洗浄剤および消毒剤の有効性を検証し、汚染源を特定して排除する必要があります。
クリーンルームの環境表面を監視する方法は2つあります。
1. コンタクトプレート
これらの特殊な培養皿には、皿の縁よりも高い位置まで培地が満たされた滅菌済みの培養液が入っています。接触プレートカバーは採取対象の表面を覆い、表面に見られる微生物は寒天培地に付着して培養されます。この手法により、表面に見られる微生物の数を定量的に把握することができます。
2. 綿棒法
これは滅菌済みで、適切な滅菌液に保管されています。綿棒を検査面に塗布し、培地から綿棒を回収することで微生物を特定します。綿棒は、凹凸のある表面や、接触プレートでサンプリングするのが難しい場所でよく使用されます。綿棒によるサンプリングは、どちらかというと定性的な検査です。
投稿日時：2024年10月21日