クリーンルームには粒子と微生物という 2 つの主な汚染源があり、これらは人的要因や環境要因、またはプロセス内の関連活動によって引き起こされる可能性があります。最善の努力にもかかわらず、汚染はクリーンルーム内に侵入する可能性があります。具体的な一般的な汚染媒体としては、人体 (細胞、毛髪)、塵、煙、ミストや機器 (実験器具、洗浄装置) などの環境要因、不適切な拭き取り技術や洗浄方法が挙げられます。
最も一般的な汚染媒介者は人です。最も厳重な服装と最も厳格な操作手順を行っていたとしても、不適切な訓練を受けたオペレーターがクリーンルームにおける汚染の最大の脅威となります。クリーンルームのガイドラインに従わない従業員は高リスク要因となります。一人の従業員がミスをしたり、手順を忘れたりすると、クリーンルーム全体の汚染につながります。同社がクリーンルームの清浄度を確保できるのは、継続的なモニタリングと汚染率ゼロのトレーニングの継続的な更新によってのみです。
その他の主な汚染源は工具や機器です。クリーンルームに入る前にカートや機械をざっと拭いただけでは、微生物が持ち込まれる可能性があります。多くの場合、作業者は、車輪付きの機器がクリーンルームに押し込まれる際に、汚染された表面の上を転がることに気づいていません。表面 (床、壁、設備などを含む) は、トリプチケース大豆寒天 (TSA) やサブロー デキストロース寒天 (SDA) などの増殖培地を含む特別に設計された接触プレートを使用して生菌数が定期的に検査されます。 TSA は細菌用に設計された増殖培地であり、SDA はカビおよび酵母用に設計された増殖培地です。 TSA と SDA は通常、異なる温度で培養され、TSA はほとんどの細菌にとって最適な増殖温度である 30 ～ 35 ℃ の範囲の温度にさらされます。ほとんどのカビや酵母の種にとって、20 ～ 25 ℃の範囲が最適です。
かつては空気の流れが汚染の一般的な原因でしたが、今日のクリーンルーム HVAC システムでは空気汚染が事実上排除されています。クリーンルーム内の空気は、粒子数、生菌数、温度、湿度について定期的に (たとえば、毎日、毎週、四半期ごとに) 制御および監視されます。 HEPA フィルターは空気中の粒子数を制御するために使用され、0.2μm までの粒子を除去する能力があります。これらのフィルターは通常、室内の空気の質を維持するために、校正された流量で連続的に稼働し続けます。湿気の多い環境を好むバクテリアやカビなどの微生物の増殖を防ぐために、湿度は通常低レベルに保たれます。
実際、クリーンルームにおける最も一般的な最高レベルの汚染源はオペレーターです。
汚染の発生源と侵入経路は業界によって大きく異なりませんが、許容できるレベルと耐えられないレベルの汚染に関しては業界間に差があります。たとえば、摂取可能な錠剤のメーカーは、人体に直接導入される注射剤のメーカーと同じレベルの清浄度を維持する必要はありません。
製薬メーカーは、ハイテク電子機器メーカーよりも微生物汚染に対する許容度が低いです。微細な製品を製造する半導体メーカーは、製品の機能を確保するために、いかなる粒子汚染も受け入れることができません。したがって、これらの企業は、人体に埋め込まれる製品の無菌性と、チップや携帯電話の機能のみを懸念しています。彼らは、クリーンルーム内のカビ、真菌、その他の形態の微生物汚染については比較的心配しません。一方、製薬会社は、生死を問わずあらゆる汚染源を懸念しています。
製薬業界は FDA によって規制されており、製薬業界における汚染の影響は非常に有害であるため、適正製造基準 (GMP) 規制に厳密に従う必要があります。製薬会社は自社製品に細菌が含まれていないことを確認するだけでなく、すべてを文書化して追跡することも求められます。ハイテク機器会社は、内部監査に合格すればラップトップやテレビを出荷できます。しかし、製薬業界にとってそれはそれほど単純ではありません。そのため、企業にとってクリーンルームの操作手順を作成し、使用し、文書化することが重要です。コストを考慮して、多くの企業は外部の専門清掃業者に清掃サービスを依頼しています。
包括的なクリーンルーム環境試験プログラムには、可視および不可視の浮遊粒子を含める必要があります。ただし、これらの管理された環境内のすべての汚染物質が微生物によって識別される必要はありません。環境管理プログラムには、サンプル抽出の適切なレベルの細菌同定を含める必要があります。現在利用可能な細菌の同定方法は数多くあります。
細菌同定の最初のステップは、特にクリーンルームでの分離の場合、グラム染色法です。グラム染色法は、微生物汚染の原因を解釈する手がかりを提供することができます。微生物の分離と同定によりグラム陽性球菌が示された場合、その汚染は人由来である可能性があります。微生物の分離と同定によりグラム陽性桿菌が示された場合、その汚染は粉塵または消毒剤耐性菌株に由来している可能性があります。微生物の分離と同定によりグラム陰性桿菌が示された場合、汚染源は水または濡れた表面にある可能性があります。
製薬クリーンルームでの微生物の同定は、製造環境でのバイオアッセイなどの品質保証の多くの側面に関連しているため、非常に必要です。最終製品の細菌同定試験。無菌製品および水中の名前のない微生物。バイオテクノロジー産業における発酵貯蔵技術の品質管理。検証中の微生物検査検証。細菌が特定の環境で生存できることを確認するFDAの方法は、今後ますます一般的になるだろう。微生物汚染レベルが規定値を超えたり、無菌試験の結果で汚染が示された場合には、洗浄剤や消毒剤の有効性を検証し、汚染源の特定を排除する必要があります。
クリーンルームの環境表面を監視するには 2 つの方法があります。
1. コンタクトプレート
これらの特別な培養皿には、皿の端よりも高くなるように調製された滅菌増殖培地が含まれています。コンタクトプレートのカバーはサンプリング対象の表面を覆っており、表面に見える微生物は寒天表面に付着して培養します。この技術を使用すると、表面上に見える微生物の数を表示できます。
2. スワブ法
これは滅菌されており、適切な滅菌液体中で保管されます。綿棒を試験表面に適用し、培地中で綿棒を回収することによって微生物を同定する。スワブは、平らでない表面や、コンタクト プレートでサンプリングするのが難しい領域でよく使用されます。綿棒サンプリングは定性的なテストです。
投稿日時: 2024 年 10 月 21 日